Chromatographie sur papier des acides aminés

C'est une description de la façon employer chromatographie sur papier des acides aminés (pour identifier des acides aminés).

Table des matières

Objectifs

  • Pour démontrer la séparation de par chromatographie sur papier
  • Pour employer pour identifier des acides aminés

Matériaux

  • Réservoir de chromatographie et couvercle
  • Papier de chromatographie (ou ), pour adapter le réservoir
  • Tubes capillaires ou pipettes de pasteur
  • Échantillons d'acide aminé dans 1 molaire (IRRITANT)
  • Échantillons inconnus (e.g. mélange 'inconnu 'ou jus de fruit filtré)
  • Dissolvant (BAW) : Butan-1-ol : : L'eau 60 : 15 : 25 (INFLAMMABLE, TOXIQUE)
  • Hairdryer ou plateau de chauffage
  • Bidon de jet de Indanetrione (ninhydrine) 1% dans butan-1-ol (INFLAMMABLE, TOXIQUE)
  • Accédez au compartiment de vapeur
  • Étuve à 100°C

Méthodes

Le dissolvant de BAW devrait être frais composé le jour.
En utilisant un crayon, tracez légèrement une ligne 1.5-2 centimètre au-dessus du fond du papier de chromatographie. Faites les petites marques à 1.intervalles de 5 centimètres suivant la ligne. Remplissez tube ou pipette capillaire près action capillaire avec votre premier échantillon. Touchez le bout du capillaire à la première marque et écartez-le . Vous devriez laisser une petite (>5 millimètre) tache humide. Laissez ce sec et appliquez l'échantillon encore. Notez lequel l'échantillon est placé sur place (vous pouvez légèrement écrire sur le papier sous la marque, à l'aide d'un crayon). Répétition pour chaque échantillon ou mélange, sur une marque différente et à l'aide d'un tube ou d'une pipette frais chaque fois. Laissez le papier sec.

Mettez 1 centimètre ou moins de BAW dans le réservoir de chromatographie. Les taches témoin ne devraient pas plonger dans le dissolvant. Placez le réservoir dans un endroit frais hors de la lumière du soleil directe. Tenez le papier de chromatographie dans le réservoir de sorte que le rebord inférieur soit dans le dissolvant mais le papier restant ne touche pas le réservoir. Placez le couvercle sur le réservoir et partez pour environ 1 heure.

En portant des gants, enlevez le papier humide et marquez où le dissolvant a atteint. Séchez le papier dans compartiment de vapeur. Dans toujours le compartiment de vapeur, pulvérisez la totalité du papier avec ninhydrine dans butanol. Séchez le papier et transférez-l'à l'étuve pendant 1-2 minutes.

Marquez la position de chaque tache qui se développe. Notez la couleur et le rf (ou la course) de chaque norme et par conséquent trouvent la composition en acides aminés des échantillons inconnus.

Risques


  • Vapeur irritante. Sur la peau ; inondation avec de l'eau. Aérez le secteur.
  • Butan-1-ol
    Fortement inflammable. Enlevez les sources d'allumage
    Nocif par inhalation. Vapeur irritante. Employez le compartiment de vapeur.
  • Molaire de l'acide chlorhydrique 1
    Irritant, peut causer des brûlures. Sur la peau ; inondation avec de l'eau. Les flaques, neutralisent avec du bicarbonate de soude.
  • Indanetrione
    Irritant. Gants d'usage. Indanetrione, renversé sur la peau, n'est pas immédiatement apparent. Il souille le pourpre de peau, semble lentement, et même travailler par des gants.
    Lavez fréquemment pour l'enlever.
  • Chaud Four ; produit également des vapeurs de Butan-1-ol.
    Enlevez les papiers portant des gants, ou utilisez le forceps. Aérez le secteur

Voyez également

 

  > Français > en.wikipedia.org (Traduit par ordinateur dans le Français)