Centrifugation de gradient de sucrose

Centrifugation de gradient de sucrose est un type de centrifugation souvent utilisé pour enveloppé virus avec les densités 1.1-1.2 gcentimètre.

Dans une application typique du processus, un gradient de densité de sucrose est créé par des concentrations inférieures doucement de recouvrement de sucrose sur des concentrations plus élevées dans un tube à centrifuger. Un gradient de sucrose peut se composer des couches diminuant du sucrose de 70% au sucrose de 20% dans des incréments de 10%. L'échantillon contenant les particules d'intérêt est recouvert sur le gradient et centrifugé dans une ultracentrifugeuse aux forces au-dessus de 150.000 x g. Les particules voyagent par le gradient et déposent à un point où la solution de sucrose assortit la densité de particules. Cette fraction peut alors être enlevée et soumise davantage à d'analyse.

Une technique semblable est centrifugation de coussin de sucrose, dans ce qu'un mélange de particules est granulé par une couche de sucrose de 20%, venez pour se reposer à l'interface avec une solution de 70%. Ceci permet la concentration des particules d'un échantillon. À la différence de la centrifugation standard qui écrase en effet les particules contre le fond du tube à centrifuger, la méthode de coussin de sucrose ne cause aucun effort mécanique et permet la collection de particules morphologiquement intactes.

Centrifugation de gradient de sucrose est fréquemment employé pour séparer des organelles de cellules des extraits cellulaires bruts.

 

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